1
|
- NÁDORY BENIGNÍ
- rostou v původním ložisku, zachovávají
charakter tkáně, ze které vznikly
- NÁDORY MALIGNÍ
- invazívní růst, poškozují strukturu a
funkci tkáně, indukují vlastní angiogenezu,
metastázují
|
2
|
- MALIGNÍ PROCES – VÍCESTUPŇOVÝ
- několik na sobě nezávislých změn v geno=
mu
jedné buňky
- premaligní stádium / maligní stádium
- mutace v protoonkogenech, tumor-supresorových genech,
mutátorových genech
- EPIGENETICKÉ FAKTORY
- genomický imprinting - souvislost s metylací baz&iacut=
e;
genů
-  =
; &n=
bsp;  =
; &n=
bsp;  =
;
(př. Wilmsův tumor)
|
3
|
- Mutace APC (5q21) – hyperplastický střevní
epitel
- Hypometylace DNA – časné adenomy
- Mutace onkogenu K-ras (12p) – střední
adenomatozní stádium
- DCC gen (18q) – pozdní stádium polypů
- Gen TP53 (17p) – karcinom
- Další změny – metastazování
|
4
|
|
5
|
- Růstové faktory: sis - PDGF, hst – FGF
- Receptory růstových faktorů: proteiny s
tyrosinkinázovou aktivitou - erb-B – receptor pro EGF=
li>
- Proteiny vázající GTP (G-proteiny): genov&aac=
ute;
rodina ras
- Tyrosinkinázy plasmatické membrány: fosforylace
tyrosinu – abl, src
- Cytoplasmatické proteiny: MAP-kinázy Raf, MEK, MAP
(signál cytoplasma ® jádro)
- Transkripční faktory: protoonkogen fos, jun, erb-A
- Kontrola buněčného cyklu: protoonkogen myc, myb
stimulují přechod z G1 do S fáze
|
6
|
- Příklad str. 145
- Definujte typ mutace v protoonkogenu c-ras.
- Jak ovlivní tato mutace přenos signálu?
|
7
|
- Bodová mutace – substituce U®=
font>G (viz genetický kód, str. 83=
)
|
8
|
- Produkt je protein, který váže nukleotid
nesoucí guanin
- Asociace s receptorem, který se váže s
různými růstovými faktory
- Po aktivaci receptoru je uvolněn GDP vázaný k c-r=
as a
naváže se GTP
- GTP aktivuje c-ras, ten předá signál
fosforylací Raf – první v kaskádě
MAP-kináz
- Tato signální dráha vede v jádře k
aktivaci transkripčních faktorů nebo genů
časné odpovědi jako např. c-myc
|
9
|
- MUTACE V TUMOR-SUPRESOROVÝCH GENECH
- RECESIVNÍ CHARAKTER
- JEDNA MUTOVANÁ ALELA MŮŽE BÝT ZDĚDĚ=
;NA
- AUTOSOMÁLNĚ DOMINATNÍ TYP DĚDIČNOSTI
- DĚDÍ SE PREDISPOSICE
- Sporadický výskyt nádorového
onemocnění: dvě somatické mutace, výs=
kyt
odpovídá frekvenci onemocnění v populaci=
li>
- Familiární výskyt: 1. mutace
zárodečná, 2. somatická
- predisposice, časný vznik nádorů,
multifokální nebo bilaterální výs=
kyt,
více členů rodiny má stejný typ
nádoru
- Hypotéza dvou zásahů (Knudson)
- Ztráta vrozené heterozygozity (LOH) – vazebn&aac=
ute;
analýza
- např. gen pro esterázu D (marker) je ve vazbě s gen=
em Rb1
|
10
|
Tumor-supresoro=
vé
geny – příčiny ztráty funkce
- Delece – mohou postihnout různé části =
genu
- Mitotická nondisjunkce
- Mitotická rekombinace
- Uniparentální disomie (oba chromosomy jsou původe=
m od
jednoho z rodičů)
- Bodová mutace
- Inaktivace produktu (vyvázání virovým
antigenem)
|
11
|
|
12
|
|
13
|
|
14
|
|
15
|
|
16
|
- Při familiárním výskytu nádoru prsu
nebo prsu a ovarií jsou v genetickém
poradenství využívány dva
tumor-supresorové geny BRCA1 (breast cancer 1) a BRCA2 (breast
cancer 2)
- Produkty obou genů BRCA tvoří komplexy s produ=
kty
dalších genů a podílejí se tak na
regulaci průběhu buněčného cyklu a př=
;i
repairu DNA
- Děděná mutace BRCA1 se vyskytuje u žen v
rodinách s familiárním výskytem
nádoru prsu, ovarií anebo prsu a ovarií
- Zárodečná mutace genu BRCA2 je asociována s
výskytem nádoru prsu u žen i mužů; u
mužů také se vznikem nádoru prostaty, pankre=
atu
a s Fanconiho anémií
|
17
|
|
18
|
|
19
|
|
20
|
|
21
|
- hMSH2, hMLH1, hPMS1, hPMS2, hMSH6, hMSH3
- Kontrola stability buněčného genomu
- Opravy chybného párování báz&iacu=
te;
(při replikaci)
- Mutace MMR genů se ve fenotypu projevují nestabilitou
délky mikrosatelitních lokusů (př. CAn<=
/sub>)
- Mutace MMR zvyšují frekvenci mutací v genomu 100
–1000x
- Mutace MMR mají recesivní charakter
- AD dědičnost nádorového onemocněn&iacut=
e;
- Lynchův syndrom I –nádory tlustého stř=
eva
a rekta
- Lynchův syndrom II - kolorektální karcinomy, a u =
30%
pacientů nádory endometria, žaludku, slinivky,
močového traktu
|
22
|
Chromosom&aacut=
e;lní
nálezy v nádorových buňkách=
div>
- Nenáhodné (primární)
- Filadelfský chromosom (Ph1)
- Translokace – Burkittův lymfom
- Amplifikace, double-minutes
- Náhodné (sekundární)
- Nepravidelně se vyskytující
chromosomální <=
/span>přestavby
(náhodné delece, translokace, dicentrické
chromosomy, prstencové chromosomy, isochromosomy ….)
- Heterogenní počet chromosomů, např.
pseudodiploidní
|
23
|
|
24
|
|
25
|
|
26
|
|
27
|
|
28
|
|
29
|
|
30
|
- Spojení postupů klasické cytogenetiky a technolog=
ie
molekulární genetiky
- Založena na schopnosti jednovláknové
(denaturované) sondy DNA vázat se
k cílové sekvenci (princip komplementarity)
- Použití pro vyšetření chromosomů
v mitoze nebo v interfázi
- DNA sonda je předem označena některým
fluorochromem (př. Texas Red, FITC, atd.)
- Je možné použít několik typů sond
– konkrétní sondu volíme podle indikace
vyšetření
- Centromerické sondy: tvořeny a-satelitními sekvencemi repetitivn&i=
acute;
DNA přítomné v oblasti centromery ®
rychl&aacu=
te;
detekce numerických aberací, zejména
v nedělících se buňkách=
li>
Lokus-specifické sondy: váží se specificky=
na
vybrané místo (lokus) na chromosomu ® stanovení některých
strukturálních změn (mikrodeleční
syndromy, specifické translokace u některých mali=
gnit
atp.)
|
31
|
- Celochromosomové sondy (malovací)
- Připraveny jako směs fragmentů DNA
konkrétního chromosomu
- Po jejich aplikaci dojde k “obarvení” celé=
;ho
chromosomu
- Používají se pro určení
některých strukturálních aberací, j=
ako
jsou translokace, inserce nebo komplexní přestavby
(hlavně v buňkách nádorů), a d&aac=
ute;le
pro stanovení původu nadpočetných marker- ne=
bo
ring-chromosomů
- Tyto sondy vyžadují chromosomy v metafázi, =
pro
interfázní jádra je nelze použít
|
32
|
|
33
|
|
34
|
|
35
|
|
36
|
|
37
|
|